Josefine Weber wurde in München geboren und studierte zunächst Jazz-Gesang am Richard-Strauss-Konservatorium, ehe sie 2001 in der Klasse von Prof. Marilyn Schmiege mit einem Operngesangsstudium begann. 2003 debütierte sie beim internationalen Musikfestival im Chiemgau als Stimme der Mutter (»Hoffmanns Erzählungen«). 2007 war sie Stipendiatin des Richard-Wagner-Verbandes München. Im selben Jahr machte sie ihren künstlerischen Diplomabschluss am Richard-Strauss-Konservatorium. Es folgte noch ein Aufbaujahr, bevor sie im Oktober 2008 an der Universität der Künste Berlin aufgenommen wurde, wo sie in der Klasse von Prof. Gabriele Schnaut ihr Masterstudium absolvierte. Im Juli 2010 sang sie in der Opernproduktion der Universität der Künste Berlin die Mère Marie (Poulencs »Dialogues des Carmélites«). Im Februar 2011 schloss sie ihr Studium mit dem Master in Operngesang ab. In der Spielzeit 2011/12 sang sie an der Deutschen Oper am Rhein die Ortlinde (»Die Walküre«). Dem hannoverschen Publikum stellte sich Josephine Weber schon als Gerhilde (»Die Walküre«) und 3. Norn (»Götterdämmerung«) vor und wird ab April 2013 fest zum Ensemble der Staatsoper Hannover gehören. 2013 folgen Engagements an der Opéra Dijon als Sieglinde und Gutrune in Richard Wagners »Der Ring des Nibelungen«.